Le but de cette manipulation est bien sûr d’obtenir une image nette avec un bon contraste et une bonne résolution. Pour obtenir une image nette, il faut modifier la distance qui sépare la platine, sur laquelle est placé l’échantillon, de l’objectif utilisé pour réaliser l’observation. On a deux possibilités:

  • soit on déplace la platine pour effectuer la mise au point (pour la plupart des microscopes droits)
  • soit on déplace le révolver porte-objectifs (pour les microscopes inversés et certains microscopes droits)

La mise au point est une manipulation banale qui ne nécessite pas forcement un article. Mais un rappel aussi simple peut servir à ceux qui débutent.

Sur la majorité des microscopes, le système de mise au point est composé de deux commandes macro et micrométrique, qui peuvent être soit séparées, soit coaxiales ce qui est préférable pour la précision et la facilité d’utilisation. C’est deux commandes se situent à la base du statif de chaque côté et se présentent sous la forme de deux boutons concentriques avec ou sans graduations pour la commande micrométrique. Il peut y avoir également un mécanisme de verrouillage de la position de mise au point pour éviter tout accident entre la préparation et l’objectif. Le bouton de mise au point micrométrique, suivant les modèles de microscope, possède une précision de déplacement vertical qui peut varier (de l’ordre du micron).

De manière générale pour réaliser une mise au point, il faut tout d’abord:

  • commencer par sélectionner un objectif à faible grossissement (par exemple l’objectif 10x)
  • actionner les commandes de la platine portant l’échantillon de manière à placer celui-ci au centre de l’axe optique
  • placer l’objectif près de la lamelle sans le coller dessus en utilisant la commande macrométrique
  • regarder dans le microscope et à l’aide la commande macrométrique, reculer progressivement l’objectif de la préparation pour obtenir une image nette
  • corriger éventuellement la position en agissant sur la commande micrométrique afin d’obtenir une netteté optimale
  • se déplacer sur l’échantillon en utilisant les commandes X-Y de la platine pour visualiser une zone représentative de l’échantillon pour votre travail (si vous avez un modèle d’entrée de gamme avec des valets, prenez soin de déplacer la lame vous même doucement, en enlevant par exemple l’un des deux valets)
  • régler le diaphragme d’ouverture en fonction de l’O.N. de l’objectif pour améliorer l’image et ouvrez le diaphragme de champ suffisamment pour éclairer correctement la zone observée (pensez également au variateur d’intensité lumineuse si vous en possédez un)

Puis:

  • basculer vers un objectif à plus fort grossissement (intermédiaire), par exemple le 40x
  • penser à ouvrir le diaphragme du condenseur à l’O.N. du nouvel objectif
  • utiliser la commande micrométrique pour affiner le réglage. Vous ne devriez pas avoir à retoucher la mise au point de manière importante (objectifs parfocaux)
  • fermer légèrement le diaphragme de champ de manière à optimiser la quantité de lumière reçue par la lentille frontale du nouvel objectif
  • agisser également sur le variateur d’intensité lumineuse car la fermeture du diaphragme entraîne une baisse de luminosité

Enfin, pour des observations nécessitant des objectif plus puissants à immersion à huile (pour ne citer que ce cas de figure) penser à:

  • faire la mise au point avec un objectif intermédiaire à plus faible grossissement avant de passer directement à l’objectif à immersion (les utilisateurs expérimentés passent cette étape, mais si vous lisez ces lignes, le conseil est a priori valable !)
  • faire tourner le révolver porte-objectifs sur une position vide, sans toucher à la mise au point ; cela vous permettra d’avoir de l’espace pour placer votre goutte d’huile à immersion sur la lamelle (surtout si le révolver est orienté vers l’avant). Déposer une petite goutte seulement pour éviter les débordements ;)
  • basculer sur l’objectif à immersion
  • agir sur la mise au point micrométrique pour ajuster la netteté et penser à agir également sur le diaphragme de champ en le fermant légèrement (O.N. plus grande)
  • si vous devez revenir sur un objectif à sec, pensez à avoir un papier optique ou une lingette absorbante appropriée pour essuyer l’huile sur la lamelle, mais également sur l’objectif pour éviter de mettre de l’huile sur les préparations suivantes !

Ce rappel succinct conviendra aux débutants et permettra d’éviter quelques erreurs de manipulations. N’hésitez pas à nous envoyer vos commentaires pour donner votre opinion, signaler une coquille, un manque, un oubli… .Cela fait toujours plaisir de savoir que l’on est lu jusqu’au bout :-) . Merci de votre lecture et à bientôt pour de nouveaux conseils !